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糖原磷酸化酶b(GPb)活性檢測試劑盒實驗原理
更新時間:2024-01-23瀏覽:861次

  糖原磷酸化酶b(GPb)活性檢測試劑盒


  紅蛋白定性檢測試劑盒

  儲存條件:-20℃

  有效期:6個月

  推薦:若使用96孔板測定,需使用96孔UV板

  英文名稱:Glycogen Phosphorylase b (Gpb) Activity Assay Kit

  別名:糖原磷酸化酶b試劑盒 GPb Kit 糖原磷酸化酶b(GPb)試劑盒 糖原磷酸化酶b(GPb)測試盒

  檢測方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

  單位:盒

  規(guī)格:100T/48S

  實驗原理:糖原磷酸化酶是糖原分解代謝中的關(guān)鍵酶,催化糖原的磷酸化反應(yīng)。該酶分為有活性的糖原磷酸化酶a(Glycogen phosphorylase a, GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(Glycogen phosphorylase b, GPb)兩種形式。糖原的分解主要在糖原磷酸化酶a的催化下進(jìn)行。未添加激活劑時,糖原磷酸化酶a催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映糖原磷酸化酶a活性。添加激活劑測定GP(GPa和GPb)總活性,未添加激活劑時測定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。

  溶液的配制:

  1、試劑二: 臨用前加入 0.5 mL 蒸館水,充分混勻;

  2、試劑三:臨用前加入 0.5mL 蒸餡水,充分混勻,可分裝后-20°C保存 4周,避免反復(fù)凍融;2、

  3、試劑四:臨用前加入 1.25 mL 蒸館水,充分混勻:可分裝后-20°C保存 4周,避免反復(fù)凍融

  4、試劑五:臨用前每支加入1mL 蒸留水,充分混勻:可分裝后-20%C保存 4周,避免反復(fù)凍融:一支即可做 100T,為延長試劑盒使用時間故多給一支。

  5、試劑六: 臨用前每支加入1m 蒸餾水,充分混勻:可分裝后-20C保存 4周,避免反復(fù)凍融:一支即可5做 100T,為延長試劑盒使用時間故多給一支。

  6、試劑七:臨用前加入2mL 蒸餾水,充分混勻,可分裝后-20°C保存4周,避免反復(fù)凍融;

  7、 工作液的配制:臨用前根據(jù)實驗所需用量,按照試劑一:試劑二: 試劑三: 試劑四 =148L:4L:4L:4uL,(1T 的量) 的比例,充分混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配.

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