一、
進(jìn)口pcr管實驗過程中的注意事項:
實驗操作注意事項盡管擴(kuò)增序列的殘留污染大部分是假陽性反應(yīng)的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一,因此,不僅要在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)是謹(jǐn)慎認(rèn)真,在樣品的收集、抽提和擴(kuò)增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意。
1、戴一次性手套,若不小心濺上反應(yīng)液,立即更換手套。
2、使用一次性吸頭,嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,吸頭不要長時間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染。
3、避免反應(yīng)液飛濺,打開反應(yīng)管時為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體于管底.若不小心濺到手套或桌。上,應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面。
4、進(jìn)口pcr管操作多份樣品時,制備反應(yīng)混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應(yīng)的準(zhǔn)確度。
5、后加入反應(yīng)模板,加入后蓋緊反應(yīng)管。
6、操作時設(shè)立陰陽性對照和空白對照,即可驗證PCR反應(yīng)的可靠性,又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性。
7、盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染,使用可替換或高壓處理的加樣器,如沒有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過程中加樣器應(yīng)該,不能交叉使用,尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區(qū)。
8、重復(fù)實驗,驗證結(jié)果,慎下結(jié)論。
總結(jié):進(jìn)口pcr管實驗過程中的注意事項小編就分享到這了,看完本文您就應(yīng)該有了基本的認(rèn)識和了解相信大家都明白了吧!總的來說,希望對大家有所幫助。